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388 Frutas del trópico
Mantenimiento
Cultivos líquidos: 2,4-D
Estos cultivos son iniciados a partir de cultivos embriogénicos en desarrollo en medio sólido
con 2,4-D. Aproximadamente 300-400 mg de PEMs deben ser inoculados en 80 ml de medio
en matraces Erlenmeyer de 250 ml, y mantenidos a 120 rpm en oscuridad. Son subcultiva-
dos cada 5-7 días. Después de, aproximadamente, un mes (depende del cultivar) el cultivo
ha proliferado lo suficiente para transferir el nuevo crecimiento a medio de embriogénesis. El
cultivo es pasado a través de un colador doméstico o de una malla de nylon. La fracción que
pase por el colador se cultiva en medio líquido para embriogénesis (LEM, liquid embryogenesis
medium). Si se desea, la fracción gruesa puede ser re-cultivada en medio con 2,4-D. Mantener
los cultivos en oscuridad a 25 C.
o
Maduración
Cultivos líquidos: LEM
Estos son subcultivados cada 5-7 días. Los embriones son transferidos a medio I de maduración
de mango (MMI, mango maturation medium I) conforme se desarrollan. La formación de em-
briones generalmente toma al menos un mes. Mantener los cultivos en oscuridad a 25°C.
Cultivos semisólidos: MMI
Los embriones son subcultivados cada mes o cuando la acumulación de fenoles alrededor del
embrión sea evidente (oscurecimiento). Estos cultivos son mantenidos en oscuridad. Trans-
ferir a medio II de maduración de mango (MMII, mango maturation medium II) cuando los
embriones formen raíces.
Universidad Autónoma de Chiapas
